聚乙二醇(PEG)是一种合成亲水性生物相容聚合物,化学结构为H−(O−CH2−CH2)n−OH,PEG在医疗、化学和工业领域均有着极为广泛的应用。PEG具有无毒、无免疫原性、水溶性和生物兼容性好等特点,可以用于修饰药物蛋白,保护药物分子,延长其作用半衰期。
聚乙二醇修饰即PEG化,是将活化的PEG通过化学方法以共价键偶联到蛋白质或多肽分子上。PEG修饰会改变药物的物理化学性质,增加药物在体内停留时间,还能影响药物和细胞受体结合的亲和力。PEG已获FDA认可,对蛋白质的改造具有无可取代的优势。聚乙二醇化修饰技术通过共价键,将聚乙二醇与被修饰药物偶联,改善药物的理化性质和生物学活性,这种技术现已广泛应用于蛋白质(肽类)、酶、抗体及小分子药物。
美国Life Diagnostics公司专注于研发和生产临床前研究以及动物医学诊断相关的ELISA试剂盒、纯化的生物标志物和抗体等产品。产品覆盖心血管疾病、急性期反应、免疫毒性和免疫学标志物等研究领域,主要应用于小鼠、大鼠、兔、猫、狗、猪、猴和鸡等物种。此外,鉴于越来越多的研究围绕聚乙二醇化(PEGylated)生物制剂,Life Diagnostics也开发了PEG相关试剂,包括抗体、ELISA试剂盒和聚乙二醇化蛋白。此外,Life Diagnostics还提供封闭缓冲液,专门设计用于免疫检测PEG或PEG化抗体。
PEG抗体
Life Diagnostics自主研发生产5种小鼠单克隆抗PEG抗体,可识别具有不同亲和力的PEG聚合物主链,还有可识别mPEG末端甲氧基的2种抗体。
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 描述 |
5D6-3 | Anti-methoxy-PEG Monoclonal, Clone 5D6-3 | 100 ug/1 mg | ● 识别mPEG链的末端甲氧基 ● Kd < 10-10 M ● 可与9B5-6-25-7配对 ● 小鼠单克隆抗体(IgG1k) |
5H4-2 | Anti-methoxy-PEG Monoclonal, Clone 5H4-2 | 100 ug/1 mg | ● 识别mPEG链的末端甲氧基 ● Kd < 10-10 M ● 可与9B5-6-25-7配对 ● 小鼠单克隆抗体(IgG1k) |
1D9-6 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 1D9-6 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特异性,可用于ELISA ● 在间接ELISA中识别分子量为550 Da或更大的PEG ● Kd = 2.88 x 10-9 M ● Life Diagnostics的试剂盒中使用了该抗体 |
9B5-6-25-7 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 9B5-6-25-7 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特异性,可用于ELISA和免疫亲和纯化(见9B5-AG) ● 在间接ELISA中识别分子量为550 Da或更大的PEG ● Kd = 1.8 x 10-9 M ● 这是Life Diagnostics亲和力最高的PEG-骨架抗体 注意:避免和吐温-20、Triton-X-10等去垢剂同时使用, 去垢剂会干扰抗体与PEG和PEG化蛋白的结合 |
3F12-1 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 3F12-1 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特异性 ● 在间接ELISA中识别分子量为550 Da或更大的PEG ● Kd = 1.84 x 10-8 M |
10E3-1-4 | Anti-PEG Monoclonal, Clone 10E3-1-4 | 100 ug/1 mg | ● 骨架特异性 ● 在间接ELISA中识别分子量为550 Da或更大的PEG ● Kd = 3.7 x 10-8 M |
PEGPAB-01 | Anti-PEG Rabbit Polyclonal IgG Antibody | 100 ug/1 mg | ● 骨架特异性-在非甲氧基PEG琼脂糖上进行亲和纯化 ● 识别分子量为550 Da或更大的PEG |
PEG ELISA试剂盒
Life Diagnostics可提供用于检测甲氧基PEG和非甲氧基PEG(游离和偶联)的ELISA试剂盒,以及用于检测小鼠、大鼠、猴子和人血清或血浆中的抗PEG-IgM和IgG的ELISA试剂盒。
● 竞争法ELISA试剂盒用于检测PEG化蛋白(含甲氧基,或不含甲氧基);
● 夹心法ELISA试剂盒用于快速检测甲氧基PEG(mPEG)和mPEG化蛋白;
● 抗PEG IgG和IgM ELISA试剂盒用于检测小鼠、大鼠和猴血清或血浆中PEG抗体的水平
产品货号 | 产品名称 | 规格 |
PEG | PEG ELISA kit | 96 well |
MPEG | mPEG ELISA kit | 96 well |
PEGG-1 | Mouse Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-1 | Mouse Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-2 | Rat Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-2 | Rat Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-3 | Monkey Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-3 | Monkey Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-10 | Rabbit Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-10 | Rabbit Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
PEGG-20 | Human Anti-PEG IgG ELISA kit | 96 well |
PEGM-20 | Human Anti-PEG IgM ELISA kit | 96 well |
图1.使用甲氧基聚乙二醇-血蓝蛋白(mPEG-KLH)对小鼠进行免疫(n=5 for each study)。收集第7天和第25天的血清样品,分别用于Anti-PEG IgM和Anti-PEG IgG的检测。用mPEG-BSA (PBSA-01) 包被的微孔板(i)和非甲氧基聚乙二醇-BSA(PBSA-01p)包被的微孔板(ii)检测,非甲氧基聚乙二醇-BSA上的甲氧基被戊酸基团取代。比较两块板上的反应活性,可评估出针对甲氧基和聚乙二醇主链的抗体水平。从上图中可以看出,在IgM研究中,来自所有5只小鼠的血清对甲氧基和非甲氧基PEG-BSA的反应活性完全一致,表明所有小鼠都产生了针对PEG主链的IgM抗体。在IgG的研究中, 5只小鼠中有4只的血清样品针对两种PEG抗原具有相同反应活性,表明这些小鼠都产生了针对PEG主链的抗体。然而,编号M888小鼠对甲氧基PEG-BSA的反应活性高出3倍,表明主要的抗体反应是针对甲氧基。
Life Diagnostics anti-PEG ELISA试剂盒中提供的是甲氧基PEG包被板。非甲氧基PEG包被板可根据要求提供。
PEG包被板和封闭缓冲液适用于有兴趣自己开发PEG试剂盒的客户。许多市售的ELISA缓冲液含有吐温-20或其他聚氧乙烯去垢剂,这些去垢剂会严重干扰PEG检测。Life Diagnostics的封闭缓冲液不含聚氧乙烯去垢剂,可用于封闭和稳定包被有PEG化蛋白或PEG抗体的板。
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 描述 |
PEGB125-1 | PEG Blocker, 125 ml | 125 ml |
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PEGD50-1 | PEG Diluent, 50 ml | 50 ml | 不能用于mPEG kit |
PEGW50-20 | PEG Wash, 50 ml (20x) | 50 ml | 不能用于mPEG kit |
PEG SPARCL™试剂盒
Life Diagnostics开发了SPARCL™ 试剂盒用于检测甲氧基-PEG(mPEG)和非甲氧基PEG。可检测游离的PEG和PEG化的蛋白质。灵敏度随PEG链长度和PEG化程度的不同而变化。
SPARCL™检测具有以下特点:
● 发光免疫测定法
● 只需一次30分钟的孵育
● 无需洗涤步骤
● 高灵敏度
● 高通量
产品货号 | 产品名称 | 规格 |
PEG-SP | PEG SPARCL™ Assay kit | 96 well |
MPEG-SP | mPEG SPARCL™ Assay kit | 96 well |
图2.对于分子量5kDa或更大的线性PEG链,观察到良好的反应性。
PEG化蛋白
产品货号 | 产品名称 | 规格 | 描述 |
PKLH-01 | Multi PEGylated KLH | 1 mg | ●适合用作免疫原或参考标准品 ●使用Life Diagnostics PEG ELISA检测,EC50为0.3 ng/ml |
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