支原体是最小和最简单的自我复制生物,其中一些可以在人类中致病,例如导致肺炎。虽然它们是细胞培养物的常见污染物,但这种污染在培养物中不容易找到可见的迹象,因为支原体可以粘附在细胞表面,而不会杀死细胞和导致培养基混浊。它们也很小,用光学显微镜观察不到。此外,目前的支原体检测方法大多费时费力。最近,Japanese cell bank 验证了由InvivoGen开发的基于等温PCR的支原体快速检测试剂盒MycoStrip的有效性,并将其检测灵敏度与其他检测方法进行了比较。实验中,将M. hyorhinis支原体(NBRC 14858)加入到VERO细胞(JCRB0111)中进行培养,稀释后的样品分别用MycoStrip、生物发光法(Bioluminescence assay)、荧光染色法(Fluorescent staining)和Nested-PCR进行检测。经证实,MycoStrip的灵敏度与荧光染色的灵敏度相当,显示出足够的检测效率证明了基于等温PCR的MycoStrip是一种简单且高度通用的支原体检测方法,因为该检测方法不需要特殊设备,将试剂与样品混合并滴在试纸上即可轻松快速地获得结果。MycoStrip可普遍用于支原体污染的常规检测。
图1. MycoStrip检测步骤与结果展示
图2. 与MycoStrip做比较的3种其他支原体检测方法
检测结果
图3. MycoStrip检测结果。在高达60倍的稀释度下检测到支原体污染,与荧光染色法的灵敏度相同。
图4. 荧光染色法检测结果。在高达60倍的稀释度下检测到支原体污染。
图5. Nested-PCR检测结果。在高达60倍的稀释度下检测到支原体污染,在600倍和6000倍稀释时,检测到支原体污染的概率为50%。
MycoStrip、生物发光法(Bioluminescence assay)、荧光染色法(Fluorescent staining)和Nested-PCR这4种方法从以下结果对比可以看出InvivoGen的MycoStrip的灵敏度比MycoAlert高约10倍,MycoAlert是一种生物发光检测法,可实现简单快速(约30分钟)的检测。此外,MycoStrip与日本药典中描述的检测方法(即荧光染色和Nested-PCR)具有相似的灵敏度。
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货号 | 产品名称 | 产品描述 | 规格 |
rep-mys-10 | MycoStrip™ | Mycoplasma Detection Kit | 10 tests |
rep-mys-20 | 20 tests |
rep-mys-50 | 50 tests |
rep-mys-100 | MycoStrip™ 100 | Mycoplasma Detection Kit (without cassette) | 100 tests |
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