免疫反应是由固有免疫细胞与适应性免疫细胞互相作用而形成的复杂反应，单独的抗体反应或者B细胞反应无法全面展现这个复杂的过程。

抗体滴度能否作为抵御SARS-CoV-2的保护性免疫指标目前还存在争议。由辅助T细胞和细胞毒性T细胞诱导的细胞免疫在保护性免疫中起重要作用，同时，T细胞可起到免疫检测的作用。

我们使用FluroSpot对7名COVID-19恢复期患者进行了研究。使用FluroSpot检测细胞因子的分泌具有很高的灵敏度，与流式细胞术相比，灵敏度可提高几百倍。FluroSpot还可以用于直接检测再次接受病毒多肽刺激时细胞因子的分泌情况。我们选择分析患者的IL-2和IFN-γ两个细胞因子来全面的评估T细胞对病毒感染的应答 (Chauvat et al, Hum Vaccin Immunother, 2014)。同时，我们使用自制的SARS-CoV-2 ELISA试剂盒来考察患者的抗体水平，并将两种方法的检测结果进行对比。

方法：

研究用血液来源于7名经PCR确诊患有轻中症SARS-CoV-2的恢复期患者。提取患者捐献血液样本的PBMC（外周血单核细胞），分别使用SARS-COV-2 peptide pool 和T cell specific peptide pools（阴性对照）进行刺激。在Mabtech IRISTM上使用Human IFN-γ/IL-2 FluoroSpotPLUS kit（250,000 cells/well）分析T细胞应答。同时，使用自制的SARS-CoV-2 ELISA试剂盒检测SARS-CoV-2 Spike RBD 特异性抗体。

结果：

所有的COVID-19恢复期患者在经过SARS-COV-2多肽刺激后均出现Th1型免疫反应。6名患者的SARS-CoV-2特异性抗体水平高于临界值，另一名患者（C7）的抗体水平低于临界值但是IFN-γ/IL-2反应性最强。

结论：

在本研究中，抗体滴度与T细胞反应似乎呈现出负相关。C4、C5、C7三位患者的抗体反应最弱，但是T细胞反应却最强，即使用FluoroSpot可获得的能够分泌IFN-γ/IL-2的细胞数最多。基于现有有限的研究我们不能得出两者具有显著的相关性。我们没有获得疾病严重程度相关的数据。但是这些数据提出了T细胞与B细胞在COVID-19疾病中的相互作用这一个重要课题。

Ni et al (Immunity, 2020) 发现中和抗体滴度与病毒特异性T细胞数呈现正相关，与我们的结果相反。这可能是由两项研究的检测样本有限和疾病严重程度不同而造成的。然而，在这项研究中，一位康复期患者的抗体水平较低不能被检测到，但是使用我们的Human IFN-γ ELISpotPLUS kit (ALP)产品却能够证实T细胞对病毒产生反应。

如上所述，我们分享了一些初期的研究数据。目前，我们与Cecil Czerkinsky (INSERM, CNRS, Université de la Côte d'Azur)等合作，共同进行类似的和更大规模的研究，以评估以上研究发现对COVID-19诊断和预后的价值。

我们刚刚发布了SARS-CoV-2 S1 S2 N defined peptide pool，可用于定量检测能够分泌SARS-CoV-2 S和N蛋白特异性细胞因子的细胞数。这个产品已经使用FluoroSpot和ELISpot对经PCR确认为SARS-CoV-2阳性的COVID-19恢复期患者的PBMC进行了验证。我们根据Ahmed et al. (Viruses) 2020，选择SARS-1和SARS-2共同的表位来构建肽库。肽库包含了41种多肽（31种MHC-I多肽，10种MHC-II多肽，每种25 µg），是S蛋白（S1 domain和S2 domain）和N蛋白的合成多肽。

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